[求救] 關於測cell proliferation(MTT)

看板Biotech作者時間16年前 (2009/08/18 17:36), 編輯推噓3(306)
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目前做實驗遇到一個瓶頸 我將一種cell line 讓他表現了一個gene之後 想要去測試proliferation能力是否增加 於是便用這兩種細胞(一個有表現,control是沒有表現那gene)去測MTT 但是... 我已經努力每個細胞都算了三次再取平均值去種細胞 經過一天後測MTT值沒有表現那gene的反而比較高 (但我一直覺得是我數的不精確) 結果也跟預期的不同 所以想問一下各位高手們 如何能夠確定一開始所種的細胞就是等數目呢? 或是能夠有其他方式測proliferation 我有想過用PI staining的方式去測cell cycle 但是PI staining似乎是比較適合差異性顯著的細胞 謝謝各位指點迷津~>< 我會很感謝您的! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.25.228

08/18 19:26, , 1F
transfection efficiency高嗎?
08/18 19:26, 1F

08/18 22:27, , 2F
有確定你數到的都是活細胞嗎?
08/18 22:27, 2F

08/18 22:37, , 3F
你的基因 會不會影響mitochondria本身的活性?
08/18 22:37, 3F

08/18 22:41, , 4F
我的gene可以用puromycin去篩選 所以存活的都有transfect
08/18 22:41, 4F

08/18 22:42, , 5F
我有染Trypan blue 去數耶 所以基本上是活細胞
08/18 22:42, 5F

08/19 22:42, , 6F
可以試crystal violet
08/19 22:42, 6F

08/21 00:10, , 7F
最近遇到相似問題,老闆也說用樓上的方法 結晶紫
08/21 00:10, 7F

08/30 18:39, , 8F
crystal violet 真的蠻快速又好用的!!
08/30 18:39, 8F

08/30 18:40, , 9F
所以表現那個基因的CELL 是經過篩選混合在一起的?
08/30 18:40, 9F
文章代碼(AID): #1AYdOWb_ (Biotech)