[方法] 要抽RNA的tissue保存?

看板Biotech作者 (Egg Dance)時間16年前 (2009/08/13 12:41), 編輯推噓2(2推 0噓 6→)
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大家好，因為學姐畢業而新生又還沒訓練好 所以現在收一組老鼠的後續實驗全都是我一個人做 要花一整天上flow(染surface marker和ICS甚至還有tetramer) 還要做epidermal sheet以及cryosection 最後就是抽RNA然後做real-time 想請問那些tissue(包括lymph node, spleen, skin)我該如何保存 skin我平常是加液態氮之後用研缽磨碎再homogenize然後加Trizol LN和spleen就是直接homogenize加Trizol 是該處理好溶在Trizol後放-80度保存嗎？ 還是乾脆tissue都先不要磨，直接放-80度隔天再抽就好？ 謝謝回答 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 211.76.175.170
推
08/13 13:01, , 1F
我的經驗是預先磨的組織保存在TRIzol中 得控制好樣品重量
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08/13 13:03, , 2F
否則樣品非常容易降解，跑RNA電泳就知道樣品狀況很不妙
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尤其是spleen最嚴重
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我的做法是 將摘取下的組織放在eppendrof泡在TRIzol中，
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然後直接用液態氮快速凍結 放-80凍藏
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要做實驗的時候再取出即可
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08/13 15:39, , 7F
感謝樓上回答
08/13 15:39, 7F
推
08/14 10:50, , 8F
我們是將sample放在eppendrof加液態氮冰凍再放入-80冰箱
08/14 10:50, 8F
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