[求救] 關於作磷酸化蛋白質的IMAC
事情是這樣的....
我用 tube 做 SPE 萃取磷酸化蛋白質
之後用elution buffer (400mM NH4OH) 沖提
10 ul X2 binding 5min 離心 5min
之後抽乾去跑 SDSPAGE
結果回收率超差的 大約5% Orz
沖提過的particles有拿去打 MS ,想見就是沖的很不乾淨
會用NH4OH 主要是大部分paper都用這個
我做出來的亮度跟paper比真的是差超多
想請問有沒有人也是用NH4OH有做出來的
或是其他方式elute的 最高可以做到幾%
感謝!!
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 125.224.133.51