[求救] 關於cloning
我的實驗是將RNA轉成cDNA後進行qPCR做基因表現的定量；在cloning的部份，之前在整理
材料與方法時，發現我以前的作法是RT-PCR反轉錄成cDNA後進行PCR，將PCR產物集合後
做clean up，之後直接進行ligation。
後來換到另一個實驗室，助理學姊反而不建議我做clean up，她的方法是cDNA進行PCR，
然後跑電泳膠，切膠進行gel extraction，產物再進行ligation。
而我去詢問她為什麼非得用gel extraction的時候，學姊的回答是因為確認反應為單一
產物。
但我不明白的是，在clean up之前，我也同樣有跑電泳確認，結果都是單一產物只有
一條band，既然如此，進行clean up 與 gel extraction有什麼差別呢？
我覺得gel extraction做出來的效率未必比clean up高，想問問有做過cloning的版友們，
在這個步驟中，gel extraction除了能純化出PCR產物外，是否有其他更重要的作用呢ꄊ
這個問題感覺很基本，但是我實在不敢去問情緒起伏較大的學姊orz
懇請版友們指引我個方向吧，感激不盡～T///T
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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