[求救] 求救TM值

看板Biotech作者 (dj)時間16年前 (2009/05/21 17:21), 編輯推噓3(306)
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我有個問題 請問 這個PRIMER怎麼計算 ATGiiiiiii 後面加了 7個inosine 但是我沒辦法用線上計算軟體計算Tm值 請有使用過這種primer的大哥 可以幫忙一下 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.80.3

05/21 20:19, , 1F
直接用gradient PCR做一次?
05/21 20:19, 1F

05/21 21:33, , 2F
這個primer只有10個mer嗎? 若是這麼短的話 試試看40度
05/21 21:33, 2F

05/21 21:34, , 3F
若無產物的話 溫度只好再降嚕~ 不需要用到gradient PCR做
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05/21 21:36, , 4F
建議配一管大量的約50~100ul template加多一點 然後分成20
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ul每試一次溫度 就取出一管 剩下的置於冰上備用
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05/21 21:37, , 6F
template量加得多的話~相對的cycle數就可以降低 跑20~25即
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05/22 02:22, , 7F
你好..請問一下這個primer是出自別人用過的嗎?
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05/22 02:23, , 8F
看起來是對start codon後面的product做放大?
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05/22 04:18, , 9F
疑...我好像看錯了..
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文章代碼(AID): #1A5Hqq32 (Biotech)