[求救] 又是lentivirus的問題...

看板Biotech作者 (This is "L2")時間16年前 (2009/05/18 13:53), 編輯推噓3(3推 0噓 3→)
留言6則, 3人參與, 最新討論串1/1
這個對於well-trained的lentivirus user來說應該是很簡單的問題^^" 我打算利用帶有GFP的lentivirus 對我們家之前自己收到的primary cancer cells建立帶有螢光的stable clone 但感染完之後(follow 中研院RNAi core的protocol) 以puro 2ug/ml篩選 最後雖然可以篩得出有發螢光的細胞(其實也不多 不管增量還是減量都一樣orz) 但這些細胞和未處理的比較 生長狀況明顯變差 至於293T 因為目前所剩病毒量有限 目前並沒有再對293T做virus的活性測試 所以不知大家覺得 如果我要trouble shooting的話 會比較建議從細胞還是病毒下手? 感恩~~~<(_ _)> -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.64.247.100
推
05/18 14:56, , 1F
follow中研院RNAi的protocal?!那vector也是嘛?!
05/18 14:56, 1F
→
05/18 14:57, , 2F
RNAi用的lenti-promoter跟大量表現用promoter有相同嘛?!
05/18 14:57, 2F
推
05/18 15:30, , 3F
中研院用的control是用CMV promoter，原po是用這隻吧？
05/18 15:30, 3F
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05/18 15:31, , 4F
應該不會自己去康U6 promoter的reporter gene吧??
05/18 15:31, 4F
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05/18 20:26, , 5F
回一樓: Yes..還有那個lenti的promotor..我得再查一下~^^"
05/18 20:26, 5F
推
05/19 02:14, , 6F
印象中~要大量表現~不應該用RNAi系統的promoter喔~
05/19 02:14, 6F
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