[求救] 請問細胞的IHC固定法

看板Biotech作者 (委員長老虎)時間15年前 (2009/04/10 11:29), 編輯推噓4(4推 0噓 8→)
留言12則, 6人參與, 5年前最新討論串1/1
各位板友及前輩好 最近小弟要做細胞的IHC 想要用甲醇,甲醛 或是福馬林固定 請問這三個固定的特性為何 因為抗體是要進細胞核的 以前做tissue染細胞核的protein 都是福馬林固定用citric acid煮沸 請問細胞也需要citric acid煮沸嗎? 感恩 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.129.77.148
推
04/10 13:05, , 1F
福馬林不就是甲醛嗎
04/10 13:05, 1F
推
04/10 14:29, , 2F
細胞不用吧 記得需要retrieval是由於蠟塊包埋的過程中
04/10 14:29, 2F
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04/10 14:30, , 3F
會使得抗體辨認位置有點變性所以才要做retrieval
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推
04/10 18:37, , 4F
染細胞核需要 只是差別在加熱時間長短
04/10 18:37, 4F
推
04/10 20:47, , 5F
若是要染核蛋白的話,建議用冰甲醇固定30秒到一分鐘
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04/10 20:48, , 6F
因為用PFA固定後還要用triton X-100在膜上打洞
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04/10 20:49, , 7F
這種打洞的效果在細胞膜上不錯,但是在核膜上不佳
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04/10 20:51, , 8F
短時間的冰甲醇固定是能把細胞膜跟核膜都部分溶解
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所以之後要染核蛋白時,有利於抗體進入核中
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04/12 16:03, , 10F
感謝各位先進的建議 小弟會試試看的 感恩<(_ _)>
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11/11 01:24, , 11F
感謝各位先進的建議 小 https://muxiv.com
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01/03 16:53, 5年前 , 12F
因為用PFA固定後還要 https://noxiv.com
01/03 16:53, 12F
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