[討論] Western 染phospho-protein

看板Biotech作者 (temptress)時間17年前 (2009/04/09 18:54), 編輯推噓2(2推 0噓 5→)
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我想請問大家... 如果western染組織的phospho-protein 在lysis的時候一定要加phosphatase inhibitor嘛？ 如果只加protease inhibitor 而且不犧牲當天跑western 染得出來嗎？ 又，如果當天犧牲當天跑western 只加protease inhibitor就染得出來了？ 那是會是甚麼原因？ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.129.77.129
推
04/09 19:45, , 1F
原始量的多寡？phosphatase的多寡？
04/09 19:45, 1F
→
04/09 20:26, , 2F
每個well load 60ug蛋白量
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04/09 20:27, , 3F
phosphatase的量應該無法知道吧?
04/09 20:27, 3F
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04/09 20:28, , 4F
phosphatase inhibitor的量是
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04/09 20:28, , 5F
inhibitor:lysis buffer = 1:100
04/09 20:28, 5F
推
04/10 13:20, , 6F
不行 一定要加 有加沒加差很多 經驗談...另外 60太多了啦
04/10 13:20, 6F
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04/10 22:33, , 7F
本來都只有load 40，但是phospho實在太弱了...
04/10 22:33, 7F
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