[求救] 病毒RNA萃取

看板Biotech作者 (我不要現在就出征....)時間17年前 (2009/03/04 14:12), 編輯推噓2(203)
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發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 請教個位大大 有人抽過活病毒的RNA嗎?? 我是用學姐留下的方法抽 但是一直抽不到 抽過的大大是否可以提供一下技巧呢?? 以下是我抽的步驟 1.吸取150μL的病毒液(先稀釋過1000倍) 2.加入Trizol 1mL 混合均勻放置冰上五分鐘 3.加200μL的chloroform 混合均勻放置五分鐘 4.離心12000轉 4度C 10分鐘 5.取上清液 6.加入 1mL isopropanol放20度C半小時 7.離心12000轉 4度C 15分鐘 8.倒上清液後加入 1mL 75%酒精 9.離心12000轉 4度C 15分鐘 10.倒掉上清液拿去烘乾後加滅菌後2次水回溶 有問題請大家指教 謝謝 ^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.71.94.5

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這不就是普通total RNA的抽出步驟嗎??
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病毒有養活嗎? 病毒量太低? 稀釋量太高?
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第一步驟稀釋量降低試試看吧....
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isopropanol沉澱是在冰上or -20 or -80,可以在此步驟加
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glycogen增加RNA沉澱的量
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文章代碼(AID): #19hXlcVl (Biotech)