[求救] RNase 加入的時機

看板Biotech作者jingyi620 (平淡超凡品味!)時間17年前 (2009/01/18 17:50)推噓7(7推 0噓 21→)

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最近再抽植物(多醣體很多)的DNA 剛開始是依照實驗室給的步驟 (CTAB) 方式抽取不過產量一直不是很高 >"< 被老闆嫌棄此方法跟我在很多書上看到的最大不同處是RNase加入的時機以及分量.... 我先po一下步驟 1.取CTAB extraction buffer + PVPP + B-Me 65度c預熱1小時 2.將粉末狀的樣品倒入步驟1.所配置的 buffer 並加入50ul RNase (10mg/ml) 與 75ul Protase (20mg/ml) 混合均勻後至於65度c反應1小時 3.加入等量CIA離心今天~剛剛加入異丙醇得到的量超少 =口= 沒有麵線狀的產物出現...... 與我前天沒有加入RNase與Protase 的結果差很多~ 加入異丙醇後可看見很多絲狀物 ~ 糾結在一起所以我一直認為~是RNase的關係.... 我看到的都是在經過CIA處理後才加入~ 不過還沒跟老闆討論 = = 因為一分證據說一分話.... 他一直覺得是我實驗手法的問題 =口= (我進實驗室6個月) 到底 >"< ..... 而且......學長有說過~PVPP會與.....結合.... 導至DNA...... 我沒聽清楚 ~囧哪位好心人可以給我建議嗎? T^T 感激不盡~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.190.74

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dankai

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dankai

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