[求救] 跑2D的Rehydration buffer 有沉澱物是為什麼

看板Biotech作者 (涼爽的天氣 悠閒的心情)時間15年前 (2009/01/17 09:55), 編輯推噓5(5推 0噓 7→)
留言12則, 7人參與, 5年前最新討論串1/1
最近因為在跑2D電泳，用一般的Rehydration buffer 去回溶sample，結果發現有沉澱物 原本以為是蛋白質沒有溶完全造成的，但結果發現如果拿原始的Rehydration buffer 去離心10000g 10mins 一樣會有沉澱物，想問各位大大這是甚麼原因造成的 配方是 7M Urea 4%CHAPS 2M Thiourea，是藥品的純度還是牌子有差，還是配法有什麼要 注意的嗎? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.55.234
推
01/17 11:04, , 1F
那應該只是tube或水裡的雜質，離心後不要吸到就好
01/17 11:04, 1F
推
01/17 18:11, , 2F
有加bromophenolblue嗎~加太多也會有沉澱物哦
01/17 18:11, 2F
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01/17 18:12, , 3F
我學長說有可能會影響到一維~但影響不大
01/17 18:12, 3F
推
01/17 19:48, , 4F
urea嗎？
01/17 19:48, 4F
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01/17 22:14, , 5F
沒加bromophenolblue 可是UREA的純度有差嗎? 99.5%的
01/17 22:14, 5F
推
01/18 02:13, , 6F
中高轉速 縱使只是均勻的懸浮物也會被你轉下來
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01/18 02:13, , 7F
還有你的rehygration buffer怎麼不含IPG buffer?
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01/18 02:13, , 8F
然後建議可以調高urea濃度 通常8~9M 可以提高蛋白質溶解
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01/18 02:14, , 9F
發現打錯字 囧 rehydration
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推
02/03 08:11, , 10F
Urea建議用純度高一點的
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中高轉速 縱使只是均勻 https://daxiv.com
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01/03 16:50, 5年前 , 12F
沒加bromophen https://daxiv.com
01/03 16:50, 12F
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