[求救] 用western blot測核內NF-kB的表現

看板Biotech作者pearls (越自由越寂寞)時間17年前 (2009/01/09 23:06)推噓6(6推 0噓 0→)

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有一個小小的實驗技術問題想請教大家: 一般測NF-kB會用western blot或EMSA 目前要做的是western blot測核內NF-kB表現然而自己在收細胞時產生一個問題就是所用的Lysis buffer似乎測不到核內的NF-kB表現做出來的結果是刺激之後，NF-kB反而減少 (但我想看的是核內要增加，才跟paper的結果吻合) 但是實驗在細胞lysis下來後，還會經過粉碎困擾的是，時間跟刺激量都跟paper的一樣，結果卻相反是否測核內的NF-kB需要特別的處理? 因為實驗室的方式似乎是測到細胞質的表現，是離心後取上清液 (也就是細胞質的NF-kB減少，進入核內了) 不知道有沒有人用western blot測過核內的NF-kB，怎麼測到核內表現而非細胞質? 另外要看核內的表現，在收細胞時有什麼要注意的事?(難道不能只取上清液嗎?) 謝謝大家~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.136.61.225

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aceliang

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tsubasawolfy

01/09 23:49, , 2^F

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jbking

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