[轉錄][問題] 如何解決PCR多一個A的問題???

看板Biotech作者 (泗水亭長作天子)時間17年前 (2009/01/01 20:55), 編輯推噓1(100)
留言1則, 1人參與, 最新討論串1/1
※ [本文轉錄自 Bioindustry 看板] 作者: s731 (好色小雄獅) 看板: Bioindustry 標題: [問題] 如何解決PCR多一個A的問題??? 時間: Wed Dec 31 13:02:56 2008 我想問一下個問大大 我在做 PCR 時 總是會在一段有12個A的部份 多做出一個A來,變成13個A 我想請問一下 有沒有什麼方法可以改善 我目前是用 pfu + taq pfu : taq = 1 : 16 的方式來跑PCR的 請各位大大提供我意見吧^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.13.116.186

12/31 16:33,
應該到BIOTECH版問看看
12/31 16:33

12/31 17:55,
用不會加A的酵素~~你用的是TA克隆的~~
12/31 17:55

12/31 17:56,
我耍笨了 沒看清楚~~~多一個 我就不知道怎麼解決了 sorry
12/31 17:56

12/31 17:56,
可以先用pfu做完反應後 再加入Taq及dATP反應30分鐘 即可
12/31 17:56

12/31 17:58,
我也耍笨了~~~
12/31 17:58

12/31 19:16,
Taq本來就會多一個a吧 你不要的話就只用pfu就好了阿
12/31 19:16

01/01 18:12,
會不會是定序訊號pick太亂導致 建議用肉眼看一下圖表
01/01 18:12

01/01 18:13,
常常有時訊號會干擾電腦的判讀 所需要用人工輔助
01/01 18:13
-- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 118.168.36.223

01/05 17:23, , 1F
我確定是多一A,看過圖也確定是多一個Orz
01/05 17:23, 1F
文章代碼(AID): #19NBr7do (Biotech)