[討論] RAPD的polymerase選擇

看板Biotech作者 (直到累倒才認輸)時間17年前 (2008/11/13 02:38), 編輯推噓2(2推 0噓 11→)
留言13則, 5人參與, 7年前最新討論串1/1
我們實驗室是用F牌的taq polymerase 昨天我要做第二次的check的時候，發現舊的用完了，冰箱也沒庫存了 我只好換了一個不同的taq polymerase來用 結果~~~除了最明顯的條帶是相同的，其他都不ㄧ樣 而我要找的差異條帶也不見了~Q Q 我自己覺得雖然都是taq polymerase，但PCR產物的量差很多 其中一個號稱效果比較好的dream taq簡直就是亮到刺眼的程度 而且產物都集中在2000 ~3000bp 請問各位大大，taq polymerase對RAPD的再現性有這麼大的影響嗎 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.240.148
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光是PCR用不同家的Taq都會有很大差異了...
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推
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有PAPER講過,RAPD就算條件和操作者一模一樣,再現性大約只有
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86.6%,其他RFLP,microsatellite,AFLP都是100%左右
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而且,RAPD超過2000bp的條帶基本上不可信,沒什麼再現性
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推
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每家的Taq跑出來的條帶都不ㄧ樣~~像我用Takara的條帶集中在
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2000多~~~如果用便宜一點的super-therm就會出現在1000上下
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再現性說真的不高~我今天作換給學弟作後...結果可能就不ㄧ
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樣了~~~ 變因超多!!@@ 我們老闆拿著過去學姐做的一直叫我們
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學妹做出ㄧ模ㄧ樣的...唉!!! 原PO你如果選定ㄧ個taq就固定
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不然RAPD以他再現性而言...會玩死你!!!
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11/13 23:34, , 11F
謝謝大家的回答~~感恩
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光是PCR用不同家的T https://noxiv.com
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01/03 16:48, 7年前 , 13F
不然RAPD以他再現性 https://noxiv.com
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