[討論] 如果只用一個RE切vector...

看板Biotech作者 (基隆王)時間15年前 (2008/11/12 23:51), 編輯推噓5(5推 0噓 8→)
留言13則, 6人參與, 5年前最新討論串1/1
因為某些因素 只把vector用BamHI切一刀 再接Insert 如果transform的時候 有做control(vector only) vector是不是有可能會自己接回來 circular form就可以被transform進去 這樣在control的plate上就會長很多colony了? 這個control是不是就不準了啊? 謝謝大家回答囉! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.167.60.29
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可做CIP
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加了CIP以後 control還是長很多耶 一直不懂為什麼會這樣?
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如果CIP有做好的話 你control的plate應該都不會有東西
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有跑膠確認RE活性?
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我直覺你沒有切乾淨,請問切的條件?用了幾U去切?
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跑膠確認是OK的 37度切3個鐘頭 final體積50ul應該是0.8U吧
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(20U取2ul)
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請問切完有冰過嗎(4度或-20度)?有的話接回去的機率會大增
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最好的辦法是切完加熱55度5分鐘,transformation塗plate確認
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要是切的很乾淨的話plate上不會長菌,跑膠不會很準
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謝謝你的建議! 我會試試看的
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01/03 16:48, 5年前 , 13F
要是切的很乾淨的話pl https://muxiv.com
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