[求救] Western雜band很多 目標蛋白反而很淡

看板Biotech作者時間17年前 (2008/11/11 22:14), 編輯推噓4(4推 0噓 4→)
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我壓了一個磷酸化的protein 如果目標的protin那個位置的band很淡 但是其他地方的雜band又多又清晰....... 這會是什麼問題呢.... 請大家幫我想想看解決的方法 我要trouble shooting... 唉 心情真差 該有東西的地方沒有 不該有的卻很多 壓久一點別的地方更深了 相對而言該有蛋白的地方還是很淡 我該怎麼辦。... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 123.192.30.178
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11/11 22:23, , 1F
呈色是有技巧的XDD
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11/11 22:47, , 2F
樓上同為Ｙ大的吧
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11/12 00:41, , 3F
你有試過datasheet上的postive control嘛?
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11/12 00:43, , 4F
先試試看吧 如果也是一樣的問題 那可能是技術問題了
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11/12 10:24, , 5F
染p-X protein 最好Blocking用BSA可以減少牛奶的雜band
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此外 wash的時候不要用PBS 要用TBS
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11/12 10:26, , 7F
如果訊號過強 IP後再去染 並且用高強度的Triton去wash
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11/13 21:36, , 8F
我的情況是2抗亂認，blocking完染2抗也有訊號，囧
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