[求救] antisense oligonucleotide (ASO)作用機制

看板Biotech作者 (rainforest10)時間17年前 (2008/11/02 07:10), 編輯推噓5(508)
留言13則, 5人參與, 7年前最新討論串1/1
在The American Journal of Human Genetics中 的一篇 Antisense Masking of an hnRNP A1/A2 Intronic Splicing Silencer Corrects SMN2 Splicing in Transgenic Mice 作者利用了antisense oligonucletide (ASO)-tiling method找到了兩個ISS區域 一個在intron6另一個在intron7 作者來用2'-O-methoxyethyl-modified(MOE)來修飾ASO 作者利用這個方法是利用怎樣的原理呢? 我目前只知道ASO是單股RNA,送入細胞後,進入核內 單股RNA會與相符合的RNA結合,產生RNAi的作用 可是如果此實驗是利用RNAi 那作者就沒辦法用RT-PCR去得知exon7是否被splicing 因為該股RNA已經被deletion掉了,不是嗎? 因為自己的基本觀念不夠 查了很多但也看不懂 如果以上有觀念錯誤,請見諒>"< -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.175.180.229

11/02 09:42, , 1F
內文倒數第2行,應該是intron 7吧??
11/02 09:42, 1F

11/02 11:19, , 2F
內文@@?PAPER嗎?還是我打的文章?是EXON7沒錯^^"
11/02 11:19, 2F
因為作者們在研究治癒SMA (spinal muscular atrophy) 發病的主要原因是病患中的SMN2在splicing時,將exon7 splicing 導致無法產生有作用的protein ※ 編輯: rainforest10 來自: 218.175.180.229 (11/02 11:22)

11/02 12:12, , 3F
喔~~那我就看不懂這篇了 @@
11/02 12:12, 3F
※ 編輯: rainforest10 來自: 218.175.180.229 (11/02 12:55)

11/02 18:13, , 4F
ASO不是當作探針?
11/02 18:13, 4F

11/02 18:16, , 5F
是in vivo或invitro的實驗
11/02 18:16, 5F

11/02 19:41, , 6F
探針@@?作者最後有說ASO可以治療SMA,克服BBB的話
11/02 19:41, 6F

11/04 11:34, , 7F
它是利用短片段RNA去遮蓋ISS的辨識位置,使exon 7被inclusion
11/04 11:34, 7F

11/04 11:37, , 8F
的機率增加,所以才可以做splicing以及overexpression後續
11/04 11:37, 8F

11/04 11:39, , 9F
所以有做ASO或是點突變破壞A1/A2 motif去確認效果
11/04 11:39, 9F

11/04 11:40, , 10F
但是由於點突變是天生的,所以認為ASO可以充當替代療法
11/04 11:40, 10F

11/04 11:42, , 11F
抱歉走眼,不一定要RNA,送入ASO只要有antisense即可
11/04 11:42, 11F

11/11 01:07, , 12F
內文@@?PAPER嗎 https://muxiv.com
11/11 01:07, 12F

01/03 16:47, 7年前 , 13F
//muxiv.com https://daxiv.com
01/03 16:47, 13F
文章代碼(AID): #193E7Uqw (Biotech)