[求救] 免疫組織切片染色(Human Nuclei)

看板Biotech作者 (dodo)時間17年前 (2008/10/30 12:08), 編輯推噓4(402)
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大家好 我是免疫組織染色的新手 最近在做Human Nuclei的染色 我們主要是將細胞移植到動物體內之後 做冷凍切片  染Human Nuclei以確定細胞是我們打進去的細胞 在In Vitro的染色上都可以染的到 但是In Vivo每次都染不到Human Nuclei 我的實驗步驟如下 1. 切片air-dry 2. 以PBST wash 3. 用5%脫脂奶blocking 4. PBST wash 5. 加入anti-HN antibody作用overnight 6. PBST wash 7. anti-mouse/FITC antibody 8. PBST wash 9. DAPI 10.PBST wash 這是我們實驗室的步驟 不知道是不是少了哪些步驟 導致一直無法染到Human Nuclei 如果大家有相關的經驗  麻煩可以給我一些意見 拜託哩!!! 謝謝!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.153.200

10/30 13:26, , 1F
有用acetic acid加熱過嗎?
10/30 13:26, 1F

10/31 19:21, , 2F
acetic acid加熱通常是用於石蠟包埋的切片樣本(Ag retrieval)
10/31 19:21, 2F

11/03 12:49, , 3F
沒有加熱耶...
11/03 12:49, 3F

11/15 18:56, , 4F
冷凍切片 還是 石蠟切片 如過是 冷凍切片 你少了 固定
11/15 18:56, 4F

11/15 19:30, , 5F
如果 你是使用 Chemicon 那隻抗體 不可用 methanol固定
11/15 19:30, 5F

11/15 19:31, , 6F
要使用 paraformaldehyde固定組織
11/15 19:31, 6F
文章代碼(AID): #192JC-PF (Biotech)