[求救] reverse transcriptase

看板Biotech作者時間17年前 (2008/10/20 17:19), 編輯推噓5(5推 0噓 6→)
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作者: aimeiting (一個人的生活) 看板: Biotech 標題: [求救] reverse transcriptase 時間: Mon Oct 20 17:19:39 2008 最近剛開始學習實驗 想請問板上的大家... 我要把cell lyse 取total RNA 用自己設計的GSP來做RT 之後PCR完要將整段insert進去vector 到時候要用RNAi去抑制表現 我RT要夾的是一個full lengh 的 gene 大概快900bp 老師希望我用有proofreading的enzyme來做 可是問題就在這.... reverse transcriptase 有具有proofreading的嗎? 還是我要找的是有proofreading的 DNA polymerase? 還有想請問大家有比較推薦的廠商嗎?我對廠商沒什麼概念... 先謝謝大家了^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.63.31
推
10/20 17:52, , 1F
1.沒有 2.Thermostable DNA polymerase 2. Pfu/Stratagene
10/20 17:52, 1F
推
10/20 18:30, , 2F
我推Finnzymes的產品
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推
10/20 21:47, , 3F
錯字太多
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推
10/20 23:29, , 4F
Transcriptor High Fidelity cDNA Synthesis Kit (Roche)
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10/20 23:30, , 5F
(blend of a RTase & a proofreading mediating enzyme)
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我們家有用過,效果還不錯,但是很貴
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※ 編輯: aimeiting 來自: 218.172.250.187 (10/20 23:58)
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10/20 23:59, , 7F
沒注意到拼字的正確..謝謝指正^^
10/20 23:59, 7F
推
10/22 16:35, , 8F
你老闆的意思應該是說PCR要用proofreading的作,以便可以夾出
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正確的full length fragment.但是900bp不算很長,一般說來稍
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好一點的taq就有這個能耐了.你作的物種是否為基因體序列定序
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已經做完的物種呢?
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