[求救] 有人會做primary culture嗎?? 請各位幫幫忙 我快瘋了>"<

看板Biotech作者 (man)時間15年前 (2008/10/02 00:48), 編輯推噓8(8推 0噓 7→)
留言15則, 9人參與, 5年前最新討論串1/1
最近老師給我新的題目要用primary chondrocyte culture當材料 但是將軟骨弄成primary culture這個過程一直有問題 我的實驗方法如下： 1.PBS wash 2.將軟骨切成小片 3.0.2% collagenase作用2-4小時 4.離心1000g 10min 5.+15%FBS 血清培養 目前情況大概是七個病人軟骨檢體 只成功過一次 那次是作用4小時 之後因為做不出來 陸續試了不同的collagenase作用時間 結果還是做不出來 而每次在顯微鏡下 都有看到細胞 但是隔天它們都不會貼 關於檢體的來源 都是開刀房病人的軟骨 有些是醫生冰在-20 過一兩個禮拜才拿給我 叫我直接冰-80要做再拿出來 有些是醫生當天開刀完拿給我 也是冰-80要做在拿出來 不知道是否是檢體的保存或是處理上出現問題 而我已經快被老師照三餐罵了 所以希望有強者幫我解惑 這樣我會非常感謝的.... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 118.232.19.111
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不要冰，馬上做如何？ 我也不知道，只是提議而已
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感謝你，我會嘗試看看是否有影響 雖然學姐告訴我冰-80
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是ok的 但是我一直做不出來 目前只能一試再試 還希望
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有人可以指點指點 謝謝
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當然不能冰,一冰細胞就都掛了
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我們都是從開刀房拿出來立刻作 primary culture 已經不容易
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不要再增加解凍的這一項變因了. 還有冰-20度 簡直是不可能
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慢速冷凍會讓細胞內有冰晶產生,細胞就死掉了
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不要冰...
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哪有人primary culture在冰的 現拿現做阿 那怕是半夜
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現在醫生真辛苦 開完刀的組織還要作防凍
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primary culture 整個放到有抗生素的medium 4度C
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我最長放過8hr 因為整棟停電後回電過猛 hood掛掉 =.="
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不要冰... https://noxiv.com
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01/03 16:45, 5年前 , 15F
//noxiv.com http://yofuk.com
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