[求救] HPLC初學者的疑問

看板Biotech作者 (癡肥宅男)時間17年前 (2008/09/23 19:36), 編輯推噓4(4推 0噓 11→)
留言15則, 5人參與, 7年前最新討論串1/1
各位前輩, 小弟我最近要使用Luna的HILIC column去分析維生素C, 我在廠商提供的目錄上找到了分析方法, 它的Mobile Phase是由A/B/C三種溶液混合, 但混合的比例我看得並不是很懂, 目錄上寫到... A/B/C (90:5:5) for 2.5 min to A/B/C (50:45:5) in 7.5 min, hold for 2.5 min. Re-equilibrate @ A/B/C (90:5:5) for 7.5 min 因為我對HPLC算是初學, 所以對上面文字的意思並不是很確定, 目錄上維生素C的peak是在5-6分鐘之間出現, 那是否我A/B/C該以50:45:5的比例混合? 另外對於HPLC的分析原理還有column的選用等相關資訊, 對初學者的我來說該怎麼去著手會比較好? 麻煩各位前輩解答, 謝謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.121.156.157
推
09/23 19:53, , 1F
Mobile Phase：A/B/C溶液比例是梯度變化？
09/23 19:53, 1F
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09/23 19:57, , 2F
A:acetonitrile B:water C:ammonium acetate
09/23 19:57, 2F
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09/23 19:59, , 3F
請問梯度變化的意思是..?
09/23 19:59, 3F
推
09/23 20:09, , 4F
用程式在7.5分鐘內，從90:5:5跑到50:45:5比例
09/23 20:09, 4F
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09/23 20:50, , 5F
剛在網路上看了一下,發現pump有分單一solvent和踢度兩種
09/23 20:50, 5F
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09/23 20:52, , 6F
實驗室的是單一的,不知道這樣是否需要重找mobile phase?
09/23 20:52, 6F
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09/23 20:54, , 7F
若是我直接配製A/B/C(90:5:5)去跑,這樣可行嗎?
09/23 20:54, 7F
推
09/23 20:58, , 8F
不行 他這樣應該為了peak shape 若機器不能跑梯度
09/23 20:58, 8F
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09/23 20:58, , 9F
只好另外找isocratic的移動相
09/23 20:58, 9F
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09/23 21:18, , 10F
感謝各位大大的解答 謝謝
09/23 21:18, 10F
推
09/26 15:43, , 11F
這是跑變化梯度，先90:5:5跑2.5min，再以7.5分鐘變換成
09/26 15:43, 11F
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09/26 15:45, , 12F
50:45:5(通常是直線變化)，接著再跳回90:5:5原始比例，
09/26 15:45, 12F
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09/26 15:46, , 13F
用7.5min平衡管柱
09/26 15:46, 13F
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11/11 01:00, , 14F
實驗室的是單一的,不知 https://noxiv.com
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01/03 16:45, 7年前 , 15F
//noxiv.com https://muxiv.com
01/03 16:45, 15F
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