[求救] 請幫我看一下我的subculture方法

看板Biotech作者 (就是愛發呆)時間17年前 (2008/09/22 21:19), 編輯推噓7(7推 0噓 7→)
留言14則, 10人參與, 7年前最新討論串1/1
我養的細胞是貼附型，用flask養 以下是我的流程: 抽出舊的medium 加入PBS 搖一下 抽掉PBS 加入trypsin 過一下下細胞都快要漂的時候加入新鮮medium沖下細胞 pipet幾次後 抽置tube (不吐光 留最後一點點計算細胞數) 離心 倒掉上清液 蓋好蓋子 敲散細胞團 加入medium votex 抽至flask 過程中都是無菌操作 液體都沒有碰到瓶口 也確定medium、PBS、trypsin等等都是無菌的 但是卻還是污染了........ 有沒有哪一步驟是有問題的呢? 另外 請問一下喔 同一個incubator 同一層 有一個flask的細胞大汙染 那麼同層的細胞也會汙染嗎?? 我已經搞不清楚到底是我的流程有問題...還是真的是被傳染的... 唉 挫折感好大>"< 請賜教<(_ _)> -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 122.117.172.169
推
09/22 21:24, , 1F
沒在旁邊看你操作 應該無法判斷吧 會不會傳染要看汙染源是啥
09/22 21:24, 1F
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09/22 21:25, , 2F
不過怎會有vortex這個動作? 是什麼細胞啊?
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那個大汙染的是黴菌+yeast 我被汙染的是yeast
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黴菌好像還蠻會傳的..
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推
09/22 21:54, , 5F
yeast 污染就直接丟了 殺不完的
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推
09/22 23:17, , 6F
vortex...學長都說這樣細胞會暈車XD
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09/22 23:21, , 7F
vortex要看細胞株 PC3這傢伙用最高速震個20次還是
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09/22 23:21, , 8F
大吃大喝根本不會死 嬌嫩的LNCaP震個一次就回去了
09/22 23:21, 8F
推
09/23 00:57, , 9F
我有聽過用glass piptte但清洗有問題因而污染的案例這樣
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推
09/23 05:48, , 10F
檢查一下你的trypsin,PBS,也許是這兩個污染了...
09/23 05:48, 10F
推
09/23 06:29, , 11F
同一個培養箱 如果也有其他人污染 應該就是互傳吧!
09/23 06:29, 11F
推
09/23 11:55, , 12F
CO2有加hepa filter嗎?
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11/11 01:00, , 13F
黴菌好像還蠻會傳的.. https://noxiv.com
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01/03 16:45, 7年前 , 14F
大吃大喝根本不會死 嬌 https://noxiv.com
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