[求救] 蝦血 RNA 抽取方式

看板Biotech作者 ( 喵喵)時間15年前 (2008/09/16 17:15), 編輯推噓18(18推 0噓 26→)
留言44則, 10人參與, 5年前最新討論串1/1
板上好像很少人在做蝦血阿@@ 我目前是使用Qiagen的RNeasy Micro Kit 先將蝦血離心沉澱pellet後(2cc蝦血只能離出約1mm-2mm pellet) 在加入kit中的RNA later 在做後續的Kit步驟 可能是限於Kit的Maximum binding capacity只有45 μg RNA (handbook上寫的) 但是我純化出的RNA通常conc.僅有0.25μg/μl (總體積10μl左右) 不知道是不是因為pellet太小的問題？ A260/A280的純度倒是很不錯 (1.9-2.0左右) Ps. sample之後是要用來做Microarray的,如果有前輩是用其他的處理方法， 可以麻煩教我一下嗎Orz -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.121.170.76
推
09/16 19:16, , 1F
抽完可以烤來吃嗎
09/16 19:16, 1F
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09/16 19:30, , 2F
= = 實驗組是下過藥的 你要烤我是無所謂啦XD
09/16 19:30, 2F
推
09/16 19:44, , 3F
對照組!!!對照組!!!!!!
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09/16 19:45, , 4F
Orz 先幫我解決問題就給你吃XD
09/16 19:45, 4F
推
09/16 20:26, , 5F
想當年..實驗室取眼柄而已...剩下的抹鹽微波來吃...:p美味~
09/16 20:26, 5F
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09/16 20:27, , 6F
整盤整盤的草蝦...一盤一盤的取眼柄，旁人一盤一盤的煮來吃
09/16 20:27, 6F
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09/16 20:28, , 7F
一般過kit的量都會比較少，可以直接用TRIZol抽嗎？
09/16 20:28, 7F
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09/16 20:30, , 8F
因為是蝦血的血球pellet,所以sample量很少
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09/16 20:31, , 9F
我之前用TRIZol抽 量多 但是純度比較低Orz
09/16 20:31, 9F
推
09/16 21:04, , 10F
Q的那個kit，是一樣通管子過膜再回溶出來嗎??
09/16 21:04, 10F
推
09/16 22:25, , 11F
預期兩CC可以抽多少RNA出來啊 又45μg還不錯多啊 要不要
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09/16 22:25, , 12F
用trizol直接抽抽看
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推
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最後一步是不是也是用水把bind在膜上的RNA回溶出來呢？
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09/16 22:26, , 14F
那可不可以用一點溫水(~30-40度C)的水回溶，有沒有可能提高
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09/16 22:27, , 15F
elute出來的量呢~? 溶解度增加 這方法可行嗎？
09/16 22:27, 15F
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09/16 23:01, , 16F
感謝大家的建議，我來去試試看之後再來報告成果^^
09/16 23:01, 16F
推
09/16 23:02, , 17F
那...我們幾個推文的 可以分幾隻對照組??? :D
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推
09/16 23:25, , 18F
想到當年上實驗課吃牡蠣。實驗只用到幾隻，助教買一大麻袋。
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推
09/16 23:42, , 19F
懷念...好幾個臉盆裝的10斤白蝦..用大桶子裝吃不完的九孔..
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還有合作代養的業者請各式各樣的海鮮...媽呀..流口水了..
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09/17 00:12, , 21F
待我瞧瞧實驗結果咩XDDD
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跟老闆說要做龍蝦拉,血多!!
09/17 11:46, 22F
推
09/17 12:03, , 23F
沒錯~~龍蝦血多!!!\($O$)/我要龍蝦對照組XD
09/17 12:03, 23F
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09/17 12:09, , 24F
龍蝦這種便宜貨 我來處理就好了
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09/17 12:51, , 25F
= =龍蝦成本好厚 Orz
09/17 12:51, 25F
推
09/17 13:05, , 26F
羨慕這種吃不完蝦子感覺的實驗@@~~
09/17 13:05, 26F
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09/17 13:56, , 27F
<==做實驗的本人為了實驗順利完全不敢吃蝦 Orz
09/17 13:56, 27F
推
09/17 19:23, , 28F
沒錯沒錯 所以當年我都幫別人做這種實驗 我自己偏選金魚 :D
09/17 19:23, 28F
推
09/18 00:51, , 29F
討論好熱烈阿~~喵喵 有離題之fu
09/18 00:51, 29F
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09/18 04:17, , 30F
我哪知道那麼多人愛吃蝦= = 該不會整篇推文其實都是熟人
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09/18 04:17, , 31F
吧 Orz
09/18 04:17, 31F
推
09/18 21:16, , 32F
其實 我很愛吃海鮮 魚蝦貝都愛...但是那次有個業者請我們吃
09/18 21:16, 32F
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09/18 21:16, , 33F
中餐時，發現我們拼命吃蝦，他就說，這個沒有我養的好吃...
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09/18 21:17, , 34F
然後 就打電話交代一下....我們回到漁塭時...等待著我們的.
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09/18 21:18, , 35F
10斤的白蝦...加點蒜頭水煮...一臉盆一臉盆的送上桌....
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09/18 21:18, , 36F
冰箱有拿不完的啤酒跟水...就這樣 整個下午聊天喝酒吃白蝦.
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09/18 21:19, , 37F
傍晚回程時，大哥拿著裝滿臉盆的白蝦..路上邊開邊吃啦..
09/18 21:19, 37F
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09/18 21:20, , 38F
自此...我整整大約一年不敢再吃白蝦... :D
09/18 21:20, 38F
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09/18 21:21, , 39F
回想那天...整張桌子擺滿了蝦殼....看官..你們能想像嗎？
09/18 21:21, 39F
推
09/19 00:32, , 40F
這會中毒吧?? 養殖藥物殘留
09/19 00:32, 40F
推
09/19 08:25, , 41F
比起那個,會酒精中毒先XDXD
09/19 08:25, 41F
推
09/20 07:36, , 42F
樓上的~您真內行!!! XD
09/20 07:36, 42F
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11/11 00:59, , 43F
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01/03 16:45, 5年前 , 44F
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