[求救] DNA agarose gel

看板Biotech作者 (舞動人生...)時間16年前 (2008/08/28 15:45), 編輯推噓9(903)
留言12則, 6人參與, 5年前最新討論串1/1
恩... 小的以agarose gel 來check RT-PCR的產物 但是我的DNA有些跑的不是很乾淨 我要看的片段是可以看到 但仍有部分DNA卡在 well 上跑不下來 請問這樣是正常的嗎? 這樣比較表現量的話會不會不準阿 還是PCR的條件還要再抓? 亦或是其他因素... 感謝大家~ 第一次PO文 多多指教 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.129.77.155

08/28 16:53, , 1F
表現量除非你用RT-PCR又定量過,不然DNA P出來不能比表現量
08/28 16:53, 1F

08/28 17:00, , 2F
就傳統半定量粗估,不是很準就是了...做個internal ctrl吧
08/28 17:00, 2F

08/28 17:19, , 3F
除非你轉mRNA=>cDNA 不然沒有所謂基因表現,只是copy number
08/28 17:19, 3F

08/28 17:54, , 4F
原PO是說他用RT-PCR產物...就是mRNA-->cDNA看表現量啦~!
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08/28 18:10, , 5F
SORRY 眼殘了@@
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08/28 21:56, , 6F
請問是不是template加太多阿?
08/28 21:56, 6F

08/29 00:27, , 7F
膠太濃?
08/29 00:27, 7F

08/29 00:28, , 8F
我們實驗室學長也有這個問題~也查不到原因!!
08/29 00:28, 8F

08/29 15:00, , 9F
2% gel。可是是paper上建議的。
08/29 15:00, 9F

08/29 15:14, , 10F
把well裡面的水吸乾看看,有時候是裡面的反光看錯@@
08/29 15:14, 10F

11/11 00:57, , 11F
11/11 00:57, 11F

01/03 16:44, 5年前 , 12F
SORRY 眼殘了@@ http://yofuk.com
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