[求救]請問PCR products用restriction enzyme切的問題
版主不好意思!!此篇是幫我姊姊代po的,如有不妥煩請告知,我會馬上刪除,
還有如果文章有什麼地方錯誤請多海涵。
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請想問一個關於使用restriction enzyme的問題,因為認識的沒有這領域專長
請問PCR products用restriction enzyme切的問題的所以想請問各位。請各位救救
我這位新手。
我在還沒切的PCR products 是198 bp,使用restriction enzyme是會分成為
20bp、78bp,但切前和切後我發現,切前marker 的100bp指標下每個sapmle
都會有霧霧的一條(有的人說那是primer的殘留,但後來跑PCR時我的primer
只加1μL,原本這樣的情況已經不見了,但這次我換了另ㄧ家廠商的Taq,不知
這和Taq的關係大不大 ? 因為換了後這次又出現了那條淡淡的ban),這樣和我
有切的照片看起來,會覺得我有切的那照片真的切出來的下面一條是78bp還是
promer的殘留?
另外一個狀況是,我的templete DNA是口腔黏膜細胞,其實量的品質很不
一定,拿去跑PCR,不切的話ban算亮的,但ㄧ拿去切,就變的很淡,有沒有什
麼方法可以讓他清楚點?? DNA去測OD範圍有點廣 40~800 ng/μL,我一直try
條件,感覺都try不到比較好的狀態。想
請教各位前輩!感激不盡!
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