[求救] 定序問題

看板Biotech作者 (owl628)時間16年前 (2008/06/13 13:30), 編輯推噓3(3推 0噓 5→)
留言8則, 4人參與, 最新討論串1/1
我把某個TA cloning產物拿去定序 同樣的insert挑了不同的三個colony去定序 結果都收到mutiple templates的回覆 可是我很確定挑的時候沒問題 我的vector是topo 2.1 定序的primer是M13 F& R 我在想會不會是我的insert理頭剛好有那對primer會辨識的序列 所以導致mutiple templates的結果 謝謝~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.139.218
推
06/13 13:40, , 1F
有這個疑慮的話 換用你PCR的primer去當定序primer試看看
06/13 13:40, 1F
→
06/13 13:43, , 2F
因為我夾insert的那對primer要一萬多塊,量又很少,所以.....
06/13 13:43, 2F
推
06/13 15:17, , 3F
那換T7定定看?
06/13 15:17, 3F
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06/13 15:27, , 4F
目前正在用T7試試看,結果還不知道,謝謝~
06/13 15:27, 4F
推
06/13 17:32, , 5F
你的primer為什麼那麼貴? 如果是很長的 另外合成其中一小
06/13 17:32, 5F
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06/13 17:33, , 6F
段(20b) 然後當定序primer看看 多花個幾百元而已
06/13 17:33, 6F
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06/15 21:54, , 7F
你的PRIMER 應該是有LABEL的吧 重定一個沒有LABEL的就好ㄌ
06/15 21:54, 7F
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06/15 21:55, , 8F
最衷心建議 換家再定一次 最近 很多公司都很瞎 錢太好賺ㄌ
06/15 21:55, 8F
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