[求救] stable cell line

看板Biotech作者 (燃燒吧! 嗨~北鼻!)時間17年前 (2008/06/06 14:18), 編輯推噓4(4推 0噓 9→)
留言13則, 4人參與, 最新討論串1/1
想請教一下大家 我的直體沒有一些抗-抗生素的基因 如果想要製造stable cell line 可行嗎? 有聽說伴隨另一個抗-抗生素的基因一起trasfection 有可能可以篩選到? (Tet-On system) 有人有這樣的經驗嗎? 謝謝各位. -- 專業. 清新. 新知. [ 了解疾病成因, 了解您服用的藥物 ] ● PTT 生物醫學 ● ● PTT 藥學. 藥物 討論板● 全部都在 國家研究院 > 科學學術 > 生醫研究院 中! >>>>>>>> <<<<<<<<<>>>> PTT pathology PTT pharmacy <<<<<<<<<>>>>>>>> << -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 133.11.70.111
推
06/06 15:16, , 1F
是可以co-transfect如pNeo這種plasmid以>3:1的比例或許可以
06/06 15:16, 1F
推
06/06 15:17, , 2F
不過 我很好奇 沒有篩選 直接看結果嗎 這樣要有好運氣
06/06 15:17, 2F
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06/06 15:18, , 3F
挑到,不過我覺得效率不佳,染IF發現mix clone只有1/100不到
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06/06 15:20, , 4F
的細胞是有表現的(只是你這要怎麼用Tet-On調控表現?)
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06/06 16:28, , 5F
喔, 謝謝blence ^^ 我不是要做tet-on 只是這種方法從tet-on
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的建構過程中(別人在做)聽到的. 所以想問一下可行與否 ^_^
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06/06 16:30, , 7F
想建構的是luc的stable, 還是直接找別種vector比較快 ^^
06/06 16:30, 7F
推
06/06 22:37, , 8F
可以把細胞稀釋 種在96well中 一格一顆 這樣種個十盤以上
06/06 22:37, 8F
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最後從長出來的那幾個去選哪個是你要的
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一整個苦功
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推
06/06 22:54, , 11F
luc似乎很少人挑stable,而且挑到還不好方便測是single,不知
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06/06 22:58, , 12F
有沒ab可用w看,不過篩選的部分還是重新剪marker來接最快了
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06/09 11:05, , 13F
謝謝大家的幫忙 ,感謝 ^^
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