[求救] western blot 蛋白質分不開><~~

看板Biotech作者 (心香水)時間17年前 (2008/05/23 10:34), 編輯推噓7(702)
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昨天泡了7.5%的膠 要分103和85 KD的protein 以以前的經驗都可以分到43KD以下 可是昨天只分到55 KD 其以下的蛋白都擠在一起了>< 前天也是>< 泡了12.5%的膠 以前都可以分到11 KD 但是那天也只分到26KD 其他的蛋白也都擠在一起分不開 害我以為泡錯%了>"< 我的marker OK 覺得應該是膠的問題 但是不知道是什麼原因呢 是我下膠solution有問題嗎 還是有什麼其他的因素><'' 請哪位好心的大德可以幫我解答呢~><~~ 感激不盡 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.161.239

05/23 10:58, , 1F
有可能是running buffer
05/23 10:58, 1F

05/23 11:40, , 2F
pH值
05/23 11:40, 2F

05/23 11:54, , 3F
tris buffer重配看看
05/23 11:54, 3F

05/23 17:51, , 4F
溶液通通重泡
05/23 17:51, 4F

05/24 12:20, , 5F
伏特數改用到150V或者200V試看看
05/24 12:20, 5F

05/27 14:45, , 6F
下膠還沒凝完全就做上膠也會有這種結果
05/27 14:45, 6F

05/27 14:45, , 7F
或者是 在做上膠之前 沒有把裡面的水分/有機液體 吸乾
05/27 14:45, 7F

05/30 12:38, , 8F
Tris pH 正確嗎? 還有跑膠的溫度會不會偏高?
05/30 12:38, 8F

06/05 14:06, , 9F
><~tris buffer重泡了~下膠凝個2小時...還是一樣阿
06/05 14:06, 9F
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