[求救] FPLC與SDS-PAGE

看板Biotech作者 (狂殺價的注音文小白><)時間17年前 (2008/05/01 15:48), 編輯推噓2(2推 0噓 0→)
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我使用FPLC來純化我的蛋白 燈源是用UV280，用gel filtration分離 FPLC打出來的圖形分成三個peak 第一個peak有我的東西(western有測到) PAGE也有看到蛋白 第二個peak是UV280最高的波峰(OD值約第一個波峰的2-3倍不等) 可是我去跑PAGE，這部分的蛋白量感覺起來很少 比第一個peak少了不少 囧> 我知道UV280可能不能完全代表蛋白量， 可是會差這麼多嗎?(這樣算多吧@@) 還有可能是哪些東西造成UV280的高波峰呢? DNA和RNA會有280的吸收嗎~ 280不是應該是芳香基的吸收值嗎>"< 麻煩大家給我點意見吧>"""< 謝謝!!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.47.33
推
05/01 16:41, , 1F
280高 也可能是多種蛋白 但個別的量都很少
05/01 16:41, 1F
推
05/02 00:35, , 2F
DNA 的吸收峰在 260, 不過量多的話 280 也會跟著變大
05/02 00:35, 2F
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