[求救] 有關cloning的問題?

看板Biotech作者 (chi)時間18年前 (2008/04/15 21:08), 編輯推噓3(3推 0噓 0→)
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我要將之前實驗室所留下來的cDNA進行蛋白質表現, 可是我發現之前留下來的cDNA量不足,無法進行之後 的實驗(recombinant plasmid的製造),所以自己想重 新利用pcr來量化這段cDNA,於是我利用當初夾出此段 cDNA的一對primer(實驗室留下來的)及以此cDNA當作 template進行pcr,並且所有pcr條件都依照當初選殖出 這段cDNA的條件來進行,結果發現目標片段濃度並不高(比原本cDNA濃度還低) ,我有是著增加template量,可是效果並無顯著改善,希望大家能幫幫忙!提供意見 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 220.133.102.249
推
04/15 21:27, , 1F
重新合cDNA~
04/15 21:27, 1F
推
04/16 12:34, , 2F
換好一點的酵素，同時可考慮把primer重新合成
04/16 12:34, 2F
推
04/17 12:41, , 3F
增加primer量、增加cycle數
04/17 12:41, 3F
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