[求救] transfer出問題！！

看板Biotech作者 (小黑豬)時間18年前 (2008/04/04 22:49), 編輯推噓8(8推 0噓 6→)
留言14則, 8人參與, 最新討論串1/1
常常在transfer之後，發現transfer不均勻，如果用ponseaou S （一種可清洗的protein 染劑），可以發現membrane上的protein並不是整齊的band，常常出現歪七扭八的樣子， 混雜有空白的部份，完全不能transfer過去的感覺（面積頗大，不太像是氣泡）。我的 membrane是PVDF，使用前先以methanol浸潤，在用dd水清洗乾淨，泡在水裡直到要使用。 我的系統是hofer。請問有沒有人曾經遇到相似的情形？實驗室都沒有人遇過，只有我！ 麻煩各位給點意見吧！ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 122.123.137.79
推
04/04 23:23, , 1F
我水洗完會泡在transfer buffer裡，你轉完buffer燙嗎?
04/04 23:23, 1F
推
04/05 01:44, , 2F
我也是泡transfer buffer直到要transfer使用之前......
04/05 01:44, 2F
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04/05 08:52, , 3F
泡transfer buffer+1
04/05 08:52, 3F
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04/05 11:26, , 4F
我是先泡transfer buffer 之後轉到dd水
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04/05 19:49, , 5F
你的machine是哪一種?
04/05 19:49, 5F
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04/05 21:04, , 6F
機器是Hofer，濕式transfer，有用水冷卻，因此不會很燙
04/05 21:04, 6F
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04/05 21:10, , 7F
家裏的人都用相同的系統，相同的membrane處理方式。
04/05 21:10, 7F
推
04/05 21:49, , 8F
PVDF泡完methanol,泡transfer buffer,就直接用 不泡dd水
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04/05 21:51, , 9F
是不是transfer buffer的問題呢? 有試過現配嗎
04/05 21:51, 9F
推
04/05 23:42, , 10F
會不會是PAGE根本就跑成如此...怎麼轉也是一樣...
04/05 23:42, 10F
推
04/06 17:05, , 11F
對厚! 隨便拿點sample 跑跑page 然後先染染看
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04/06 20:50, , 12F
buffer現配的，PAGE染過沒問題，超想哭的。
04/06 20:50, 12F
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04/12 22:52, , 13F
把學長的PAGE切一半 拿來transfer XD
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04/12 22:52, , 14F
所有的材料都跟大家一樣 只有操作人不同嗎
04/12 22:52, 14F
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