[求救] 關於protein定量...如果不經過lysis細胞

看板Biotech作者 (螺旋)時間16年前 (2008/03/24 08:25), 編輯推噓2(201)
留言3則, 2人參與, 最新討論串1/1
我們在收完細胞後,並不會加lysis buffer 而是直接將細胞加入sample buffer後,煮10min 就直接loading做western的分析, 因此我們會盡量將cell數目控制在相近的量才收下來 再利用internal control來比較protein的相對量。 但是最近想要試試看比較準確的定量方式, 可是因為要看的protein是核內的, 所以一般lysis buffer有時會無法完全取出protein, 我們比較過一些比較強的lysis buffer 和直接煮掉的western 發現我們要看的protein在lysis buffer中的含量明顯少於直接煮掉的sample 因此想要請問看看 是不是有可以不經過lysis細胞就能定另protein的方式呢? 謝謝 -- * .. * . . . * * ﹏﹏ * 朵朵的浪花 隨著風的旋律悸動著 . .. . .. ◥▇█◤ \● 遠方的黑暗 彷彿是一場夢的開始 ˍˍ ═╦═╦═╦█\╦═╦ 孤獨的夜裡 細細想著自己的瑣事 █ \● || ║ ║ 那是一種微薰而未醉的感覺...... █﹥ http://www.wretch.cc/blog/popopon by Popopon /| -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.177.238

03/24 14:21, , 1F
我們家有用6M urea lyse細胞後sonicate
03/24 14:21, 1F

03/24 14:22, , 2F
之後還是可以測Biored
03/24 14:22, 2F

03/28 21:28, , 3F
你可能要用到BIO-RAD的RC-DC, 但之前應該不能放DYE
03/28 21:28, 3F
文章代碼(AID): #17vlJWPq (Biotech)