[求救] 請問有關vinculin細胞螢光染色
小弟目前正在趕一批細胞骨架螢光染色
主要要看actin與vinculin的變化
目前手上的染劑
vinculin (m)一抗是用abcam的
接invitrogen的二抗 Alexa 488-IgG(m)
actin以 Rhodamine-phalloidin
問題來了~目前雙染的結果
actin有出來(絲狀)OK!!
而vinculin照理說染出的結果應該在細胞的外圍或actin末端產生綠螢光點狀
BUT我染出來的總是整顆細胞都是綠的.....@#$%&#
一直不懂問題出在哪裡??
還請各位有染過vinculin的大大們幫我解惑一下~
拜託了~感嗯感恩!!
PS.我的大致步驟
Triton X100 0.1% RT 10min
BSA blocking 2% RT 1hr
1 Ab overnight 4C
2 Ab RT 1hr
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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