[求救] 蛋白質溼式transfer至PVDF membrane的怪現象

看板Biotech作者時間16年前 (2008/03/07 18:20), 編輯推噓2(2推 0噓 8→)
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已有爬過文,不過沒有看到跟我一樣的問題... 我們家是用 C.B.S SCIENTIFIC DCX-700的機器做transfer 機器圖片連結： http://www.cbsscientific.com/index.asp?PageAction=VIEWPROD&ProdID=57# 我一次是transfer一片gel,另一側釋放一塊擋板（機器當初附的） transfer的condition是 150 mA 90 min 4度C PVDF membrane: 8cm X 6cm transfer buffer: 0.025 M Tris 0.192 M Glycine 0.10% SDS 20% methanol 看到的奇怪現象是在transfer之後拿membrane去染Ponceau S, 發現membrane上面出現的是用來夾住gel跟membran的夾子上格子的紋路 整張membrane上都是空白格子中間挾著紅色方塊的圖形 只有最旁邊的marker是一條一條的band 請問有人遇過跟我一樣的情形嗎？ 是機器的問題或是我操作上在哪裡有可能出現忽略的部份嗎？ 麻煩大家指教了.......謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.115.48.151
推
03/07 20:42, , 1F
你夾子沒洗乾淨 有殘留的鹽類 下次用之前多沖幾次就沒事了
03/07 20:42, 1F
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03/08 10:11, , 2F
感謝回答 我再去試試看
03/08 10:11, 2F
推
03/08 15:03, , 3F
Ponceau S不是染蛋白嗎 為什麼和鹽類有關呢?問一下...
03/08 15:03, 3F
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03/10 16:54, , 4F
感謝一樓的回答 我把transfer的夾子洗乾淨 transfer
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03/10 16:56, , 5F
就ok了 謝謝
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03/10 16:57, , 6F
回答三樓：整件事情是因為trnasfer完之後用Ponceau S染,
03/10 16:57, 6F
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03/10 16:58, , 7F
發現transfer到membrane的protein pattern很怪,跟
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03/10 17:00, , 8F
transfer用的夾子一樣 一格一格的（沒有band）所以推測
03/10 17:00, 8F
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03/10 17:01, , 9F
在做transfer時,出了問題,然後問題出在夾子沒洗乾淨,有鹽
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03/10 17:03, , 10F
殘留在夾子上造成的
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