[求救]關於MTT assay用於計算組織培養的細胞量
請問板上的各位,有人是做組織培養,然後用MTT assay來計算Scaffold
上成長的細胞量嗎?
我的實驗流程如下:
1.將培養一天之後的scaffold,移除舊有的medium,以PBS wash,
再加入新的medium 及MTT reagent(2.5mg/ml),放入incubator 37度C
作用3hr
2.抽取MTT和medium上清液,以PBS wash,再用DMSO溶解formazan
3.取100ul溶解均勻的formazan至ELISA plate,並以DMSO當作blank
讀取OD值
以上的實驗步驟,如果是control組或是做standard curve,操作都會非常順利
但在scaffold上 ,操作到第二個步驟時,DMSO卻很難滲入Scaffold溶解formazan
可能是因Scaffold是3D網狀結構,所以滲透需要一些時間,有試過放久一點,甚至都超過半
天了,還是無法均勻溶解,請問有人跟我一樣嗎?如果放在37度C作用可以嗎?還是要
換個溶劑去溶解呢?
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