[求救]有關IHC的問題

看板Biotech作者 (佑翔太MAN? 那改成薰吧.)時間18年前 (2008/01/30 23:48), 編輯推噓6(6011)
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之前我在做IHC,是使用ZYMED的KIT, 其中blocking、一抗、二抗、...以及DAB呈色時,都為了避免浪費, 都是把上述試劑滴在sample上,然後用適當大小paraffin覆蓋其上。 但是目前我新作的石蠟切片非常容易飄起來, 而且因為組織切片本身面積比較大,所以變很容易在這樣的處理中使它凹折或是破碎。 所以我想問: 1.有沒有蓋paraffin以外的方法可以處理? 2.我有閱讀KIT的說明書,其中有提到一抗時可放在潮濕盒 如果我想用潮濕盒的方法,那麼潮濕盒該怎麼做呢? 3.在這同時我Hematoxylin總是染的不夠深,但我之前最長已經染過1min了, 所以也想請問如果是用KIT的大家都染多久呢? PS.我的組織是養cell line然後注射進老鼠,之後再取下生成的tumor這樣。 麻煩各位先進了。 BY 研一菜鳥 <(_ _)>....... -- 因為在那一漫天紛飛的落葉中, 只有一片會在願意理解並同情的持續注視下,在那個瞬間永遠靜止。 ---------駱以軍--------- -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 211.74.180.250

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wet chamber 拿個可以密封的保鮮盒裡面舖層紙巾 用的時
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候加水 總之讓盒子裡溼度越高越好Ab才不會乾掉
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請購買Pap pen 一種疏水性的筆 可在section周邊畫圈但很貴
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你用潮濕盒是沒用的喔 要減少使用體積只能用畫圈法
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一支pap pen 要價2000-2500左右 通常要一次買兩支
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請問潮濕盒沒用的意思是還是很容易乾掉嗎? 那麼有沒有其他
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可用的方法?
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一抗的時候也可蓋parafin 可以把Slides 肩並肩排好
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一次蓋一大塊這樣省麻煩 再放入wet chamber中
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hematoxilin不夠深就再加長時間 如果還是不行 就重新配吧
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Sample太大可能不好切 如果可以 就把smaple切成比較小塊
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補充一下 一抗使用的體積視sample大小而定
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一片直徑1cm的sample 15ul即可
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阿 原文沒看清楚 sorry~~
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謝謝大家~~
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HEMATOXYLINE 染完可以泡氨水 藍化
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氨水的濃度和作用時間可以請教一下嗎?
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文章代碼(AID): #17e9mtB_ (Biotech)