[求救] 蔗糖梯度離心-lipid raft

看板Biotech作者 (12)時間18年前 (2008/01/15 21:11), 編輯推噓4(403)
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我最近在分離lipid raft 利用5% & 35% sucrose 跑超高速離心, 36000rpm,16h 總覺得自己在做梯度的時候沒做的很好,我是慢慢加sucrose 但是梯度液面之間感覺分界不是很明顯.. 之後將每個fraction 去做cholesterol分析 有lipid raft的fraction 和沒有lipid raft的fraction 做出來cholesterol差異不大... 有lipid raft的fraction的cholesterol約12ug 沒有的lipid raft的fraction的cholesterol約8ug 有沒有做過lipid raft的前輩可以給我意見指導一下,怎麼抽出來的效果不理想 已經做了三個禮拜..... 拜託了!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 192.192.9.1

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離心時間加長??g值拉到100000x g??
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不過不知道你的rotor型號所以也不知道36000 rpm多少g
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你有查過類似的實驗嗎?
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先加5%的然後用長針管插到底加35%的~注意氣泡~OVER
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參考 paper,另外 gradient 可以多弄幾層
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密度梯度分的更細一點看看..
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題外話..感覺做 lipid raft 很炫很新耶..XD
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文章代碼(AID): #17ZB3e2x (Biotech)