[求救] 要做長片段的PCR
最近要夾一個片段
估計裡面是有intron存在
因為用cDNA是可以夾出來
但是換成genomic DNA就不行了
跑完膠後乾乾淨淨 一點東西都沒有
想說可能是片段太長了
有爬文看了一下 不過還是不太懂
如果將Taq換成Pfu可以改善嗎?
我們家是用invitrogen的Taq DNA polymerase
還是我將extension時間拉長就可以了? 目前是設定 3 min
那dNTP的濃度要提高嗎? 目前是2mM 5ul
希望大家可以幫我解答一下 拜託了謝謝
p.s大小預估是4kb 這樣普通的Tag有能力做的出來嗎?
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