[問題]prokaryote可以做3'RACE嗎?

看板Biotech作者時間18年前 (2007/11/23 15:10), 編輯推噓1(1推 0噓 2→)
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如題, 請教板上的高手 我想要clone某個bacteria的full length gene 長度約2.4kb, 目前已知中間約1 kb的序列 我去查其他人的研究 一般做RACE(rapid amplification cDNA ends)都是真核的生物 mRNA 3'端有poly A tail, 可以用poly T的primer 那原核生物的mRNA沒有poly A tail, 要怎麼做3'RACE呢? @@ 謝謝^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.7.59 ※ 編輯: pocheng0227 來自: 140.112.7.59 (11/23 15:14) ※ 編輯: pocheng0227 來自: 140.112.7.59 (11/23 15:14)
推
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個人看法: 原核可以不考慮intron的問題, 所以做Inverse PCR
11/29 00:17, 1F
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去看已知片段周圍的序列吧(用Genomic DNA做)
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得知序列後, 再用PCR Amplify做clone即可
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