[求救] 如何做好 real-time PCR?

看板Biotech作者 (情人去死)時間18年前 (2007/11/13 00:54), 編輯推噓2(2推 0噓 0→)
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我的cDNA是一年多前翻的 濃度應該是16ng/ul 一直都冰在-20。C 用18S RNA當作internal control 每次都做duplicate,total 15 ul 今天作出來的結果 18S的duplicate CV都在0.5以下 但我的target gene 做4組 有3組CV超過0.5 版上的高手能不能給些做Q-PCR該注意的建議 或者說說做Q-PCR自己的一些小方法，來防止duplicate跑掉 現在覺得很沮喪，這個問題困擾我三個禮拜了 無法確定到底是我技術的問題 還是cDNA不穩定所導致 Q.Q -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.25.118.144
推
11/13 07:49, , 1F
如果cDNA是用dT primer做出來的，rRNA可能沒有辦法保存下來
11/13 07:49, 1F
推
11/13 09:29, , 2F
cDNA primer是用randome hexamer做出來的
11/13 09:29, 2F
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