[求救] 想請問有沒有人送過蛋白定序

看板Biotech作者 (阿矇)時間18年前 (2007/10/30 00:45), 編輯推噓3(3推 0噓 6→)
留言9則, 2人參與, 最新討論串1/1
因為我的蛋白表現完後發生斷掉的情況 我現在想要知道他是從哪邊開始斷的 所以我想要送protein給人定序 不知道版上是否有學長姐有送過protein定序的經驗(maldi tof / NMR ?) 是否可以提供一下經驗 像是哪間公司或學校不錯之類的然後我再去找資訊 謝謝唷:) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.113.173.246
推
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想知道從哪邊開始斷的
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10/30 08:15, , 2F
只能做N端定序吧
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推
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從你的前後文,似乎很想知道表現18kda從何來,可是1.那並非只
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有被切,有可能是轉譯遇到不容易放的aa,2.有看到40-18=22kda
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大小的另一段嗎? 3.除非你的本來就是Ecoli的蛋白,不然探討
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一個蛋白在不相干的物種被切(真的被切)還用MS,是不是偏離主
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題了? 畢竟這種狀況其實做重組蛋白表現都很容易遇到阿
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你如果要完整的蛋白來打抗體,只要表現多一點,利用PAGE把
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band切下來純化就很純了,接下來才是最煩惱抗體能不能用的事
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