[討論] IEF電壓上不去!

看板Biotech作者 (尋訪美妙好滋味)時間18年前 (2007/10/21 10:16), 編輯推噓11(11推 0噓 9→)
留言20則, 6人參與, 最新討論串1/1
最近在跑IEF時 電壓就是沒辦法上到原本設定的8000V 通常我們解決的方法 不就是多清洗幾次protein 讓鹽類降低 或者說IPG buffer濃度不要太高影響他的導電度 我想請問板上的大哥大姐們 <(_ _)> 大家會用什麼方法增加它的導電度或降低本身的鹽類 還是溶解protein的sample buffer 裡面的urea也會影響!? 謝謝!<(_ _)>祝大家實驗順利! ---- 小弟最近洗那些sample 洗到在度估!真該死> < -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.127.27.83
推
10/21 11:25, , 1F
用acetone先沉澱看看
10/21 11:25, 1F
推
10/21 12:24, , 2F
謝謝一樓!^^ 我目前就是用acetone沉澱的!
10/21 12:24, 2F
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10/21 14:38, , 3F
我之前跑電壓也都上不去 不過安培數有到我的設定值
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10/21 14:38, , 4F
大約過了一個小時 電壓才慢慢衝上去
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10/22 02:09, , 5F
用90%的acetone洗洗看~可能會讓更多的鹽類溶解出來~!
10/22 02:09, 5F
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10/22 08:34, , 6F
^^謝謝大家~ 如果使用100% acetone效果會不會更佳!?
10/22 08:34, 6F
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10/22 19:07, , 7F
可先把100% ACETONE冰在-20後 直接拿來WASH pellet
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10/22 19:07, , 8F
另check ampholyte buffer的final濃度是否超過建議用量
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10/22 19:08, , 9F
即IPG buffer...
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10/22 19:09, , 10F
正常情形應是可直接到達8000 若需過一段時間才能上去
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10/22 19:09, , 11F
可回頭CHECK版友所提的所有問題...
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10/22 19:10, , 12F
應是salt過高 致conductivity過大 使A變大 V上不去
10/22 19:10, 12F
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10/22 23:43, , 13F
感謝P大~~^^~ 目前電壓已經上去!我把IPG buffer濃度降低~
10/22 23:43, 13F
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10/22 23:44, , 14F
雖然是慢慢爬上去...我會在check一下!^^~ 祝大家實驗順利!
10/22 23:44, 14F
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10/23 14:23, , 15F
我以前是用 70% 冰冷 Acetone 洗 30 次以上
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10/23 14:24, , 16F
sample 是植物非水溶性蛋白~~ 效果勉強可以看~~
10/23 14:24, 16F
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10/23 15:04, , 17F
S大~我佩服你!!@@~30次....我洗十幾次洗到在度估!
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10/23 15:05, , 18F
我的sample也是植物的非水溶性蛋白! 加油~
10/23 15:05, 18F
推
10/25 01:12, , 19F
洗30次...sample會不會lost掉太多阿?
10/25 01:12, 19F
推
10/25 23:20, , 20F
哇塞~好厲害喔~洗30次~這樣一整天就沒了~!佩服佩服~!
10/25 23:20, 20F
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