[求救] 萃取細菌genomic DNA

看板Biotech作者 (過了1/2個大學生活...)時間18年前 (2007/10/15 23:33), 編輯推噓4(4推 0噓 8→)
留言12則, 2人參與, 最新討論串1/1
請問 如果萃取細菌genomic DNA 能不能用Alkaline lysis 方法 在加入MX3 buffer離心後 留下沉澱物(genomic DNA,protein,少量plasmid DNA) 去掉上清液(大都plasmid DNA) 然後再用PCI或CI等等去掉protein 留下的DNA 就是要萃取的genomic DNA 這樣的方法可行嗎? 或是有其他可以把genomic DNA跟plasmid DNA兩者分開的方法? 學校實驗課 儀器不多不高級 能做出純度高的當然更好 謝謝各位!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 59.113.187.217
推
10/16 02:55, , 1F
烏鴉是沒用過(也沒聽說過)您說的方法抽 genomic DNA ...
10/16 02:55, 1F
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10/16 02:58, , 2F
不過烏鴉知道一些線上的傳統方法或許會符合您的需求...
10/16 02:58, 2F
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10/16 02:59, , 3F
參考 http://0rz.tw/d43ae 第四個的方法感覺還頗容易
10/16 02:59, 3F
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10/16 03:00, , 4F
就加減參考吧... 因為MX3的鹽類(HOAc/KOAc?)下去以後...
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10/16 03:01, , 5F
應該就不容易把 genomic DNA 完整的取回來了, 它們
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10/16 03:02, , 6F
很容易斷裂...
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推
10/16 03:27, , 7F
非常純的 genomic DNA 純化除了用 kit 那套 spin-column
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10/16 03:28, , 8F
方法外烏鴉就不清楚了, 還望知道的高人補充 ._./
10/16 03:28, 8F
推
10/16 18:18, , 9F
這種方式我用過 (如果你指的M3 是所謂的 HOAc/KOAc 的話)
10/16 18:18, 9F
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10/16 18:20, , 10F
另外有些人把你那種作法 適用在較大的plasmid 也有人用
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10/16 18:22, , 11F
NH4OAc
10/16 18:22, 11F
推
10/16 18:33, , 12F
抱歉喔 沒有看到 Genomic DNA 哈哈 拍謝啦
10/16 18:33, 12F
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