[求救] 做construct時各片段間的切位
我正在做3個片段黏接的construct
EcoRI--A片段--NheI--B片段--NcoI--C片段--NotI
由於當初設計切位沒考慮清楚,導致A片段不能用NcoI切
因為先是把3個片段分別接在pGEMT中,所以想利用vector上面的切位
我要問的問題是... 各片段相接處有6個bases的cutting region
會影響到時候蛋白質的表現嗎?
如果不會的話(因為我是第一次做,很多不了解)
那我是否可以在片段間再多加6個bases的cutting region連接
這樣就可以避免哪個片段會被必須要的酵素切到
EcoRI--A--NheI--ApaI--B--Nco--C--Not
以上是否可行呢?
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