Long range PCR with pyrophosphatase
我現在在做Long range PCR,目標product大約是8-10K,
用Fermentas的kit下去做,可是有一個問題,
就是smear會很嚴重,跑膠後照出來都像耙子耙過一樣。
後來去查了一下改善方法,買了pyrophosphatase來用,
好像也沒什麼用耶@@
我買的濃度是0.1u/ul的,kit上的說明是這樣:
one unit of enzyme catalyzes the hydorlysis of 1 micormole of inorganic
pyrophosphate in 1 minute at 25℃.
這樣的意思是說我加進去之後要讓他在室溫下作用一段時間才上機嗎?
有沒有使用過的前輩可以提供點建議給小弟?
感謝!
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