[問題]基因出了問題! @@
大家好! @@
我有一個cDNA將其尾端以PCR方式加上 His tag
然後再接回原本的expression vector內，但是transfection到動物細胞時表現不出來
後來以Baculovirus expression system表現也沒東西
原本是想說會不會是tag沒接好~但是定序後又發現都是對的
所以將其切下接到pET系列的Vector時，以IPTG誘導後
以western blotting檢示發現有很多bend出現(幾乎是ㄧ條抹下來的!)
所以基因本身是沒問題的囉?!
所以我現在在懷疑會不會是原本在動物細胞的表現載體上Vector本身出問題?
請大家指教一下! 感恩! @@! 這個基因的表現困擾我好久了= =
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