[問題] Sequence DNA products的前置步驟

看板Biotech作者 (Jan)時間17年前 (2007/07/11 08:34), 編輯推噓2(2推 0噓 1→)
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這問題我自己都覺得有點鳥，請問各位如果已經用gel extraction elute出 　　想要的fragment後，在拿去sequenceing之前，大家還會再做一次SAP/Exo I的 　　cleanup嗎？我之前都習慣性的兩樣都做，不過前幾天學妹問我說這兩項應該是 　　具有相同或類似的效果，是不是gel extraction完就可以直接拿去sequencing了 　　後，我才很呆地開始認真思考這問題。因為gel extraction確實已經purify我的 　　PCR products了（至少應該去掉SAP/Exo I所用來吃掉的多的primer和dNTP）， 　　好像沒有必要再多做SAP/Exo I cleanup。雖然我兩項都做幾乎拿回來的sequences 　　都蠻好的。謝謝。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 24.91.129.40
推
07/11 10:47, , 1F
經過gel purify的產物就可以拿去送定序了..我是這樣做的
07/11 10:47, 1F
推
07/11 12:56, , 2F
許多PCR cleanup產品都可以純化PCR產物而且排除40~100mer以
07/11 12:56, 2F
→
07/11 12:59, , 3F
下的產品,如果非必要gel extraction甚至只要cleanup就夠了
07/11 12:59, 3F
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