[問題] 有人用過Zymo Research的EZ DNA Methylation-Gold Kit嗎?
這套kit 是以bisulfite來處理DNA，使DNA上的 C convert T
目前是萬造代理。
我想問的是，在kit中附的protocol，有一段不太懂...
2. Place the sample tube in a thermal cycler and perform the following steps:
(1) 98℃ for 10 minutes
(2) 64℃ for 2.5 hours
(3) 4℃ storage "up to" 20 hours.
3. Add 600μl of M-Binding Buffer into a Zymo-Spin IC Column and place the
column into a privided Collection Tube.
到這裡為止，只做到全部的一半
有疑問的是，步驟2中，up to 是什麼意思?因為字面上的意思應該是，一直到20個小時
但是他用storage這個字，所以不太確定這個步驟是不是必須的，我猜有兩個意思:
(1) 必須在4℃中存放20個小時，才能往下面的步驟做
(2) 如果要中斷實驗，放4℃暫存最多只能存放20個小時
這兩個意思有很大的差別，但是不知道哪個是正確的...orz
當初交我做的人，是告訴我第2個意思(所以通常只要時間夠做完全部的部份，甚至直接
跳過4℃這個步驟，直接往下做)，但是我的直覺是第1個。
還想請問，如果跳過4℃沒做，會有什麼結果?convert會不佳嗎?(因為猜測4℃是為了中止
bisulfite的作用)
先謝過各位高手解答~~~
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