[問題] 請問抽RNA 加完isopropanol後 到底應該怎麼辦?

看板Biotech作者 (快樂的理由)時間18年前 (2007/06/21 12:42), 編輯推噓9(9推 0噓 3→)
留言12則, 9人參與, 最新討論串1/1
之前我的作法 都是加完ISOPROPANOL(稍稍搖勻後) 離心13000xg 可是後來覺得這樣抽出來的RATIO不是很好 問了學姊 學姐跟我說 加完ISOPROPANOL可以放-80 O/N 他說這樣會比較好 因為用的是TRIZOL 他的PROTOCOL寫說加完ISOPROPANOL後 直接放室溫10分鐘就可以離心 我今天用了這個方法 結果離心完 盡然什麼東西都沒有一點沉澱也沒 請問大家的經驗都是如何呢? 呼 我的RNA一直抽不好~~泣 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.64.211
推
06/21 12:44, , 1F
沉澱不一定看的到，繼續做70%酒精wash。
06/21 12:44, 1F
推
06/21 13:02, , 2F
加完isopropanol後要mix均勻後再靜置
06/21 13:02, 2F
推
06/21 13:36, , 3F
推樓上...要混勻再靜置，靜置時間可大於10分鐘...
06/21 13:36, 3F
推
06/21 13:51, , 4F
如果確定有混勻後再離心還是看不到沉澱,那有可能是你抽出
06/21 13:51, 4F
→
06/21 13:52, , 5F
來的RNA量太少了,所以才沒看到沉澱
06/21 13:52, 5F
推
06/21 16:58, , 6F
恩有沉澱也不一定是好事..有可能是protein或是雜質沉澱
06/21 16:58, 6F
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06/21 16:59, , 7F
ratio如果>2.0表示有有機溶劑在裡面,如果<1.8表示有可能
06/21 16:59, 7F
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06/21 17:01, , 8F
有protein在其中,我們實驗室也是室溫10 min
06/21 17:01, 8F
推
06/21 20:48, , 9F
嗯,沉澱不ㄧ定看得到,RNA很乾淨或很少都有可能...
06/21 20:48, 9F
推
06/21 22:57, , 10F
看不見不代表不存在 測了REAL TIME就會知道
06/21 22:57, 10F
推
06/22 15:21, , 11F
想再請問 我今天讓它靜置約10分鐘 怎麼顏色變成淡黃色了呢
06/22 15:21, 11F
推
02/24 10:53, , 12F
IPA 壞暸 會產生黃色
02/24 10:53, 12F
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