[問題] E. coli表現純化完之後有GroEL

看板Biotech作者ATKINS (ATKINS)時間17年前 (2007/06/13 23:58)推噓4(4推 0噓 1→)

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我的cDNA是接在pET41上上面有His tag和GST fusion 但是經過兩個affinity tag的chromatography純化之後跑SDS-PAGE時發現除了我的target protein以外就是有一個band一起存在而且由SDS-PAGE看來量也不少於是做in-gel digestion送MS之後確認是GroEL 就是E. coli本身的chaperonin 這個protein就像我們所知的chaperone一樣會形成complex來幫助folding 找資料試了一些方法像是加MgATP處理不過看來效果都不是很好 @@ 不知道有沒有人遇到過相同的問題可以一起分享一下嗎像是該怎麼處理或怎麼分離之類的..... 謝謝~~^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.113.184.123

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wangba

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ATKINS

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csardas

06/14 07:13, , 3^F

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